山東液相色譜系統(tǒng)的固定相和流動相介紹
點擊次數(shù):1448 更新時間:2019-09-26
山東液相色譜系統(tǒng)的固定相和流動相
一、液相色譜系統(tǒng)的固定相
常用化學(xué)鍵合相的種類和性質(zhì)
(1)非極性鍵合相:十八烷基硅烷鍵合相是常用的非極性鍵合相。非極性鍵合相通常用于反相色譜。
(2)弱極性鍵合相:可作為正相或反相色譜的固定相,視流動相的極性而定。
(3)極性鍵合相:一般都用作正相色譜的固定相。氰基鍵合相和氨基鍵合相是常用的極性鍵合相。氨基鍵合相不宜分離帶羰基的物質(zhì),流動相中也不得含有羰基化合物。使用硅膠基質(zhì)的化學(xué)鍵合相時流動相中水相的pH應(yīng)維持在2-8,否則會引起硅膠溶解。
其他種類的固定相
手性固定相(CSP):分為蛋白類CSP、多糖CSP、環(huán)糊精CSP、π-氫鍵型CSP、大環(huán)抗生素類CSP、配體交換CSP
二、山東液相色譜系統(tǒng)的流動相
HPLC對流動相的基本要求:
(1)化學(xué)穩(wěn)定性好,不與固定相發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
(2)對試樣有適宜的溶解度。要求k在1-10范圍內(nèi),在2-5的范圍內(nèi)。
(3)必須與檢測器相適應(yīng)。例如用紫外檢測器時,只能選用截止波長小于檢測波長的溶劑(4)純度要高,黏度要低。低黏度流動相如甲醇、乙腈可以降低柱壓,提高柱效。
流動相對分離的影響
在HPLC中,n由固定相及色譜柱填充質(zhì)量決定,α主要受溶劑種類的影響,k受溶劑配比的影響。增加流動相中強(qiáng)溶劑的比例,其洗脫能力增強(qiáng),使k變小。
溶劑的強(qiáng)度和選擇性。